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CCK-8試劑盒 細胞培養(yǎng) 細胞增殖

  • 產(chǎn)品價格:170
  • 更新時間:2024-04-24

簡要描述:CCK-8試劑盒 細胞培養(yǎng) 細胞增殖
CCK-8(Cell Count Kit-8)是一種利用WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)快速檢測細胞增殖或毒性試驗的方法。

產(chǎn)品詳情
品牌YOBIBIO/攸碧艾貨號U22-001A
規(guī)格500T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細胞轉(zhuǎn)染、增殖應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥
概述: CCK-8(Cell Count Kit-8)是一種利用WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)快速檢測細胞增殖或毒性試驗的方法。WST-8是一種類似MTT的四唑鹽,在電子載體的存在下,被活細胞內(nèi)的脫氫酶還原生成水溶性的橙黃色Formazan(甲臜),通過比色法檢測甲臜生成量可以反映試驗中活細胞的數(shù)量。

操作方法:
細胞毒性檢測
1. 接種細胞:接種對數(shù)期的細胞至96孔板,接種數(shù)量1~5×103個/孔,每孔100 μl,每組設(shè)置3~5個復(fù)孔,置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱;
2. 樣品處理:待細胞貼壁后,加入不同濃度的樣品處理細胞,然后置于培養(yǎng)箱中孵育一定的時間(如:24 h、48 h、72 h);
3. CCK-8孵育:每孔加入10 μl的CCK-8試劑,輕輕混勻,并將培養(yǎng)板置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育1~4 h;(可進行預(yù)實驗確定孵育時間);
4. 上機檢測:將孵育后的細胞培養(yǎng)板置于酶標儀上,在450 nm處檢測其吸光值;
儲存條件: 4℃保存,半年有效;-20℃保存,兩年有效
2. 以Hela細胞為例,細胞按1.25×103 ~ 20×103個/孔的密度梯度接種至96孔板中,培養(yǎng)4 h后,待細胞全部貼壁,每孔加入10 μl的CCK-8試劑,輕輕混勻,置于培養(yǎng)箱中孵育1 h后,在450 nm處檢測其吸光值,并制作標準曲線。
注意事項:
1. 使用前先將低溫保存的試劑在室溫條件下放置20-30 min。
2. 接種對數(shù)期生長的細胞,注意使細胞分散均勻,確保每個復(fù)孔中的細胞數(shù)量一致,減少誤差。
3. 為了達到最佳的實驗效果,建議先進行預(yù)實驗,確定最佳的細胞接種密度及CCK-8試劑孵育時間;以貼壁細胞為例,接種密度約1~5×103個/孔;孵育時間為1~4 h,多數(shù)細胞孵育約30 min即可觀察到明顯的顏色變化。
4. 設(shè)置空白對照,在無細胞的培養(yǎng)基中加入CCK-8檢測,去除本底對吸光值的干擾。
5. 如果OD值太高,建議降低細胞接種密度或減少CCK-8試劑孵育時間。
本公司所有產(chǎn)品僅供科研使用!

 

 
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